HPLC.ELSD法测定芪红胶囊黄芪甲苷含量发表论文版面费

分类：药学论文发表 时间：2013-11-05 14:00 关注：(1)

　　【摘要】 黄芪多糖中的主要有效成份是多糖和黄芪苷。黄芪苷分为黄芪苷Ⅰ、黄芪苷Ⅱ、黄芪苷Ⅳ。其中生物活性最好的是黄芪苷IV即黄芪甲苷。

　　【关键词】 芪红胶囊;黄芪甲苷;高效液相色谱,医学论文发表

　　黄芪甲苷不仅具有黄芪多糖的作用，还有些是黄芪多糖无法比拟的作用，其药效强度是常规黄芪多糖的2倍多，抗病毒作用更是黄芪多糖的30倍。由于含量少，效果好，更是有“超级黄芪多糖”之称。

　　芪红胶囊是由黄芪、红花，冰片、桃仁等多味药材制成的中药复方制剂，具有活血化淤、通络止痛的功效，临床主要用于治疗冠心病(气虚血淤型)，疗效确切。方中黄芪是芪红胶囊的君药，其药用有效成分主要是黄芪甲苷(astragaloside IV)。为了控制药品的质量，本文选择黄芪甲苷作为含量测定指标，建立HPLC?ELSD法分离测定芪红胶囊中黄芪甲苷含量的方法，为中药芪红胶囊的质量标准研究提供依据。

　　目的 建立芪红胶囊中黄芪甲苷的含量测定方法，为芪红胶囊质量标准的研究提供依据。方法 采用HPLC法分离并测定了中药芪红胶囊中黄芪甲苷的含量。色谱条件：Diamnosil C18柱(460 mm×250 mm,5 μm)，以乙腈?水(体积比35∶65)为流动相;蒸发光散射检测器(ELSD)。 结果：此方法线性为2.53～15.18 μg，平均加样回收率为99.4%。结论 本方法精密度高，分离度良好，可用于中药芪红胶囊中黄芪甲苷的含量测定。

　　本篇论文发表在《中国医药科学》 杂志是中华人民共和国卫生部主管，海峡两岸医药卫生交流协会与二十一世纪联合创新(北京)医药科学研究院主办的国家级综合性医药专业学术期刊，全国人大副委员长桑国卫为本刊亲笔题写了刊名并担任名誉总编。

　　1仪器与试药

　　1.1仪器Waters 600E泵高效液相色谱仪，Waters M32色谱工作站;SEDEX 55蒸发光散射检测器(法国)(漂移管温度60 ℃，增溢为7，气压2.1×105 Pa);Mettler AE240(十万分之一)天平(梅特勒-托利多上海仪器有限公司);SYZ?A石英亚沸高纯水蒸馏器(江苏信达仪器厂)。

　　1.2试药黄芪甲苷(中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，批号：0781?200301);乙腈(色谱纯, Tedia Company, Inc., Fairfield, OH,USA);芪红胶囊(广州鑫升科技公司提供，规格：0.4 g/粒，批号：20060307，20060308，20060309)。

　　2方法与结果

　　2.1色谱条件的选择 Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm) (迪马公司产) 为色谱柱;乙腈?水(体积比35∶65)为流动相;柱温：30 ℃;流速1.0 mL/min;SEDEX 55蒸发光散射检测器(漂移管温度60 ℃，增溢为7，气压2.1×105 Pa)。在此色谱条件下，黄芪甲苷与样品中其他组分分离良好，理论板数按黄芪甲苷色谱峰计大于3 000。色谱图见图1、2。

　　2.2对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品12.65 mg，置25 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

　　2.3供试品溶液的制备精密称取样品8 g，加水50 mL使溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取5次，每次30 mL，合并正丁醇液，以氨试液洗涤5次，每次20 mL，弃去氨试液，合并正丁醇液，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，微孔滤膜(0.45 μm)滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

　　2.4线性关系考察分别精密吸取上述对照品溶液5、10、15、20、30 μL，注入液相色谱仪，照上述色谱条件测定黄芪甲苷峰面积，以对照品进样量(m) 自然对数为横坐标、峰面积值(A) 自然对数为纵坐标，绘制标准曲线，测定结果表明，黄芪甲苷对照品在进样量2.53～15.18 μg范围内呈良好的线性关系，回归方程为：A=1.521 0m+10.666 2，r=0.999 7。

　　3讨 论

　　3.1供试品溶液的制备由于黄芪甲苷类成分在正丁醇中的溶解度比较大，因此选用正丁醇进行提取，经回收试验证明方法可行。作者曾试验采用未经氨试液处理的供试品溶液进行测定，含量大大偏低，故供试品溶液经氨试液处理才能进行含量测定。

　　3.2检测器的选择黄芪甲苷的含量测定法有薄层扫描法[1～3]，紫外检测的HPLC法[4]及HPLC?ELSD法[5～6]，由于薄层扫描法对黄芪甲苷的含量测定结果误差大，紫外检测的HPLC法则选择203 nm的末端吸收波长来测定，其误差也很大，故目前专家建议采用HPLC?ELSD法测定，此方法减少了误差，满足了含量测定的要求，故本文也选择蒸发光散射检测器。

　　3.3流动相的选择HPLC测定选择了乙腈?水(体积比35∶65)，乙腈?水(体积比30∶70)，甲醇?水(体积比35∶65)几种流动相体系，通过比较分离情况，确定了上述体系，该体系使各成分得到了较好的分离，满足定量的要求。

　　黄芪甲苷可特异性和非特异性的排除侵入肌体的异物，对特异、免疫和非特异性免疫均有促进作用，提高机体的抗病能力。能促进机体抗体的生成，可使抗体形成细胞数和溶血测定值显著增强。黄芪甲苷能显著提高球虫免疫鸡的淋巴细胞转化水平和E—玫瑰花环形成率，是单核—巨噬细胞系统的有效激活剂。黄芪甲苷还可以提高氧化作用，提高免疫器官中GSH-PX、SOD活性，提高免疫防御和免疫监视功能。

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