探究戈谢病细胞免疫表型及吞噬功能

期刊目录网医学校验论文发表2014-02-26 16:48关注(1)

　　戈谢细胞是由于葡萄糖脑苷酶缺乏和减少，因而在单核-巨噬细胞系统的细胞内积聚大量葡萄糖苷脂而形成。有关戈谢细胞免疫表型报道甚少，仅陈辉树报道1例脾脏戈谢细胞免疫组化结果为CD33、HLA-DR、CD45、CD71(Wu67)为阳性，CD3、CD4、CD8、CD22、CD38、CD41为阴性[3]。

　　关键词： 戈谢病,免疫表型,吞噬

　　戈谢病(Gaucher's disease)是一种罕见的脂类代谢异常性疾病，临床资料报道较多，实验室研究资料尚少。我们通过对3例戈谢病骨髓中戈谢细胞的免疫表型及吞噬功能研究，发现戈谢细胞主要表达淋巴细胞抗原，高度表达B淋巴细胞抗原，同时证实戈谢细胞具有吞噬功能。

　　1　材料与方法

　　1.1　标本来源　取自3例戈谢病患者骨髓液，迅速制成薄涂片，同时取骨髓液做吞噬功能试验。免疫组化于24 h后进行。

　　1.2　试剂　ABC试剂盒、单抗购于中国医学科学院血液学研究所。

　　1.3　方法

　　1.3.1　ABC免疫酶法　按操作说明书进行。

　　1.3.2　戈谢细胞墨汁吞噬功能测定　取肝素抗凝骨髓液100 μl，参考陈群芳方法[1]，37℃孵箱中，孵育2 h，涂片，用瑞氏染色观察。

　　1.3.3　戈谢细胞吞噬细菌功能测定　参考临床免疫学方法[2]，实验时按墨汁吞噬功能方法操作。

　　1.3.4　戈谢细胞吞噬胶乳颗粒功能测定　采用市售胶乳颗粒(3.6×108 ml-1)，实验时按墨汁吞噬功能方法操作。分级标准：“0”：细胞内未吞噬胶乳颗粒。“+”：细胞内含有1～10个胶乳颗粒。“++”：细胞内含有15～30个胶乳颗粒。“+++”：细胞内含有30～50个胶乳颗粒。“++++”：细胞内含有大于50个胶乳颗粒。

　　2　结果

　　2.1　3例戈谢细胞免疫组化结果　结果判断标准分别为强阳性：戈谢细胞呈弥漫的棕黄色，胞浆边缘及条索状结构着色浓厚。细胞核为蓝色，上面覆盖一层棕黄色。胞核模糊不清。阳性：戈谢细胞着黄色，胞浆边缘及条索状结构着色较深，胞核为蓝色，清晰。弱阳性：戈谢细胞浆为淡黄色，细胞边缘及条索状结构着色稍深。胞核为蓝色，清晰。阴性：戈谢细胞浆不着色，核为蓝色。3例戈谢细胞免疫表型结果为：CD8、CD9、CD10、CD18、HLA-DR均为强阳性表达;CD3、CD33、CD15均为阳性表达;CD22均为弱阳性表达;CD7、CD14、CD41均为阴性;CD2、CD4、CD19、CD383例中均为1例阳性表达，而且CD38为强阳性表达。

　　2.2　3例戈谢细胞的吞噬功能结果　吞噬墨汁的吞噬率分别为75%、90%、95%。吞噬指数分别为105、148、198;吞噬细菌的吞噬率分别为70%、89%、81%，吞噬指数分别为21.5、27.6、22.5;吞噬胶乳颗粒的吞噬率分别为75%、82%、86%，吞噬指数分别为90、103、107。

　　3　讨论

　　我们测定的骨髓戈谢细胞CD33、HLA-DR、CD41的结果与其相同，但其它单抗结果则有一定差异，有待进一步观察。3例戈谢细胞免疫表型说明，戈谢细胞主要表达淋巴细胞抗原，高度表达B细胞抗原，而且细胞阳性程度强。髓系抗原部分表达，但阳性程度较弱。提示戈谢细胞主要起源于B淋巴细胞，但也涉及多细胞系，细胞的阳性程度不一，可能与抗原浓度及对单抗的亲和力有关。陈璋认为HLA-DR、CD38、CD18为非系列特异性抗原[4]。文献报道HLA-DR、CD38、CD33为干细胞或未成熟细胞标志，戈谢细胞HLA-DR、CD38、CD33为阳性，表明戈谢细胞是处于早期的单核细胞。

　　戈谢细胞是被激活的特殊巨噬细胞，其结构和形态发生变异后，是否仍具有吞噬功能?实验结果证实，戈谢细胞具有吞噬功能，但吞噬率及吞噬指数明显下降。Marodi报道，戈谢病患者对严重感染有较高的易感性，原因是戈谢病患者的单核巨噬细胞在杀死细菌和产生O-.2超氧化物阴离子的中间环节上有缺陷。患者的单核细胞杀死活的细菌和释放O-.)2能力比对照组的细胞要低得多(P<0.05)[5]。戈谢细胞吞噬功能降低可导致免疫功能下降，致使戈谢病患者易发生感染。戈谢细胞具有吞噬功能也说明了戈谢细胞确实来源于单核巨噬细胞系统。

　　参考文献：

　　[1]陈群芳，王志澄. 血液病患者白细胞墨汁吞噬功能试验. 中华血　　液学杂志，1981;2(2)：121

　　[2]甘　芾，陈　璋.临床免疫检验学.天津：天津科学技术出版社，1990：340

　　[3]陈辉树. 戈谢氏病脾脏病理形态及免疫组化特征1例. 中华血液学杂志，1992;13(2)：65

　　[4]陈　璋. 何谓人类白细胞分化抗原：CD分类的由来，目的与实际意义. 国外医学*输血及血液学分册，1990;13(1)：30

　　[5]Marodi L,Kapos T R, Toth J et al.Impaired microbicidal capacity of mononuclear phagocytes from patients with type 1 Gaucher disease:partial correction by enzyme replacement therapy.Blood,1995;86:4645

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